পণ্য

আমাদের পূর্ববর্তী গবেষণাগুলি KSHV সংক্রমণের প্রাথমিক এবং শেষ পর্যায়ে উভয় ক্ষেত্রেই এর গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা প্রকাশ করেছে।এই গবেষণায়, আমরা মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডিগুলির একটি প্যানেল ব্যবহার করে ORF45 এর ইন্টারঅ্যাটোম জরিপ করেছি।পূর্বে চিহ্নিত এক্সট্রা সেলুলার রেগুলেটেড কিনেস (ERK) এবং p90 রাইবোসোমাল S6 kinase (RSK) প্রোটিন ছাড়াও, আমরা ∼38 kDa এবং ∼ 130 kDa-এর বিশিষ্ট প্রোটিন সহ আরও বেশ কিছু কপিউরিফাইড প্রোটিন খুঁজে পেয়েছি।ভর স্পেকট্রোমেট্রি প্রকাশ করেছে যে 38-kDa প্রোটিন ভাইরাল ORF33 এবং 130-kDa প্রোটিন হল সেলুলার ইউএসপি7 (ইউবিকুইটিন-নির্দিষ্ট প্রোটিজ 7)।আমরা ORF33-বাইন্ডিং ডোমেনটিকে ORF45-এর উচ্চ সংরক্ষিত কার্বক্সিল-টার্মিনাল 19 অ্যামিনো অ্যাসিড (aa) এবং USP7-বাইন্ডিং ডোমেনকে ORF45-এর কেন্দ্রীয় অঞ্চলে উল্লিখিত ঐকমত্য মোটিফের সাথে ম্যাপ করেছি।ইমিউনোফ্লোরোসেন্স স্টেনিং ব্যবহার করে, আমরা ORF33 বা USP7 এর সাথে ORF45 এর সমষ্টিকরণ লক্ষ্য করেছি উভয় স্থানান্তরিত অবস্থায় এবং KSHV- সংক্রমিত কোষে।তদুপরি, আমরা নিউক্লিয়াস থেকে সাইটোপ্লাজমে ORF33/USP7 এর একটি অংশের ORF45-নির্ভর পুনঃস্থাপন লক্ষ্য করেছি।আমরা দেখেছি যে ORF45 ORF33 প্রোটিন সঞ্চয়ের বৃদ্ধি ঘটায় যা ORF33- বা ORF45-এর USP7- বাঁধাই ডোমেন মুছে ফেলা হলে বিলুপ্ত করা হয়েছিল।অধিকন্তু, KSHV জিনোমে ORF45-এর সংরক্ষিত কার্বক্সিল টার্মিনাস মুছে ফেলার ফলে KSHV-সংক্রমিত কোষে ORF33 প্রোটিনের মাত্রা মারাত্মকভাবে কমে যায় এবং বংশধর ভাইরিয়নের উৎপাদন রহিত হয়।সম্মিলিতভাবে, আমাদের ফলাফলগুলি শুধুমাত্র ORF45 ইন্টারঅ্যাকটোমের নতুন উপাদানগুলি প্রকাশ করে না, কিন্তু এটিও দেখায় যে এই প্রোটিনের মধ্যে মিথস্ক্রিয়াগুলি KSHV লাইটিক প্রতিলিপির জন্য অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ৷ কাপোসির সারকোমা-সম্পর্কিত হারপিসভাইরাস (KSHV) বেশ কয়েকটি মানব ক্যান্সারের কার্যকারক এজেন্ট৷KSHV ORF45 হল একটি বহুমুখী প্রোটিন যা KSHV লাইটিক প্রতিলিপির জন্য প্রয়োজন, কিন্তু সঠিক প্রক্রিয়া যার দ্বারা ORF45 এর সমালোচনামূলক কার্য সম্পাদন করে তা স্পষ্ট নয়।আমাদের পূর্ববর্তী গবেষণায় জানা গেছে যে কোষের সমস্ত ORF45 প্রোটিন উচ্চ-আণবিক-ওজন কমপ্লেক্সে বিদ্যমান।তাই আমরা ORF45 এর ইন্টারঅ্যাক্টোমকে বৈশিষ্ট্যযুক্ত করার চেষ্টা করেছি যাতে লিটিক প্রতিলিপির সময় এর ভূমিকাগুলির মধ্যে অন্তর্দৃষ্টি প্রদান করা যায়।মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডিগুলির একটি প্যানেল ব্যবহার করে, আমরা KSHV- সংক্রমিত কোষগুলিতে ORF45 ইন্টারঅ্যাটোম জরিপ করেছি।আমরা ORF45 এর দুটি নতুন বাঁধাই অংশীদারকে চিহ্নিত করেছি: ভাইরাল প্রোটিন ORF33 এবং সেলুলার ইউবিকুইটিন-নির্দিষ্ট প্রোটিস 7 (USP7)।আমরা আরও দেখাই যে ORF45 এবং ORF33 এর মধ্যে মিথস্ক্রিয়া KSHV ভাইরাল কণাগুলির দক্ষ উত্পাদনের জন্য অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ, পরামর্শ দেয় যে এই মিথস্ক্রিয়াটির সাথে লক্ষ্যযুক্ত হস্তক্ষেপ KSHV লাইটিক প্রতিলিপিকে বাধা দেওয়ার জন্য একটি অভিনব কৌশল উপস্থাপন করতে পারে।