পণ্য

ট্রাইস অ্যাসিটেট লবণ প্রায়শই TAE (Tris-acetate-EDTA) বাফার তৈরিতে ব্যবহৃত হয়, যা চলমান বাফার হিসাবে এবং অ্যাগারোজ জেলে ব্যবহৃত হয়।ট্রিস অ্যাসিটেট-ইডিটিএ বাফারটি ডিএনএ অ্যাগারোজ জেল ইলেক্ট্রোফোরসিসের জন্য ব্যবহৃত হয় তবে এটি অ-ডিনাচারিং আরএনএ অ্যাগারোজ জেল ইলেক্ট্রোফোরসিসের জন্যও ব্যবহৃত হয়।ডাবল-স্ট্র্যান্ডেড ডিএনএ অন্যান্য বাফারের তুলনায় TAE-তে দ্রুত গতিতে চলে এবং বর্ধিত ইলেক্ট্রোফোরসিসের সময় নিঃশেষ হয়ে যেতে পারে।বর্ধিত ইলেক্ট্রোফোরসিসের সময় বাফার সঞ্চালন বা বাফার প্রতিস্থাপন নিম্ন বাফারিং ক্ষমতার প্রতিকার করতে পারে।সমাধানে DNA এর গতিশীলতা অধ্যয়ন করতে বিভিন্ন ঘনত্বে ব্যবহার করা যেতে পারে।যেহেতু TBE বাফারে বোরেট (Tris-Borate-EDTA Buffer, 10X Powder Pack, sc-296651) অনেক এনজাইমের জন্য একটি শক্তিশালী প্রতিরোধক, তাই ডিএনএ নমুনার জন্য এনজাইমেটিক অ্যাপ্লিকেশনগুলি দেখার সময় TAE বাফার সুপারিশ করা হয়।ট্রাইস অ্যাসিটেট লবণ ফায়ারফ্লাই লুসিফেরেসের সাথে এটিপি অ্যাসেসে উচ্চ সংবেদনশীলতা সহ একটি বাফার।

ব্যবহার: TAE চলমান বাফার হল ডিএনএ অ্যাগারোজ জেল ইলেক্ট্রোফোরসিসের জন্য সবচেয়ে বেশি ব্যবহৃত বাফার, এবং এটি স্থানীয় আরএনএ অ্যাগারোজ জেল ইলেক্ট্রোফোরসিসের জন্যও ব্যবহৃত হয়।ডাবল-স্ট্র্যান্ডেড ডিএনএ অন্যান্য বাফারের তুলনায় TAE-তে দ্রুত অগ্রসর হতে থাকে, তবে দীর্ঘায়িত ইলেক্ট্রোফোরসিসের সময় বাফার আয়ন হ্রাসের কারণে সাঁতার কাটতেও ব্যর্থ হয়।দীর্ঘায়িত ইলেক্ট্রোফোরসিসের সময় বাফার সাইক্লিং বা বাফার বিনিময় কম বাফার ক্ষমতার জন্য ক্ষতিপূরণ দিতে পারে।2 40 মিমি ট্রিস অ্যাসিটেট এবং 1 মিমি EDTA, pH 8.3 ধারণকারী 1 mMTAE বাফার পেতে ঘনীভূত TAE বাফার পাতলা করুন।1 mMTAE বাফার অ্যাগারোজ জেল এবং চলমান বাফার হিসাবে উভয়ই ব্যবহার করা যেতে পারে।সর্বাধিক রেজোলিউশনের জন্য, এটি সুপারিশ করা হয় যে প্রয়োগ করা ভোল্টেজ 5V/সেমি (ইউনিট ইলেক্ট্রোডের মধ্যে দূরত্ব) এর চেয়ে কম হওয়া উচিত।

প্রয়োগ: TAE চলমান বাফারটি কেমিক্যালবুক জেলে ডিএনএ অ্যাগারোজ জেল ইলেক্ট্রোফোরসিসের জন্য সবচেয়ে বেশি ব্যবহৃত বাফার, এবং এটি অ-ডিনাচারিং আরএনএ অ্যাগারোজ জেল ইলেক্ট্রোফোরসিসের জন্যও ব্যবহৃত হয়।ডাবল-স্ট্র্যান্ডেড ডিএনএ অন্যান্য বাফারের তুলনায় TAE-তে দ্রুত অগ্রসর হতে থাকে, তবে দীর্ঘায়িত ইলেক্ট্রোফোরসিসের সময় বাফার আয়ন হ্রাসের কারণে সাঁতার কাটতেও ব্যর্থ হয়।দীর্ঘায়িত ইলেক্ট্রোফোরসিসের সময় বাফার সাইক্লিং বা বাফার বিনিময় কম বাফার ক্ষমতার জন্য ক্ষতিপূরণ দিতে পারে।ঘনীভূত TAE বাফারটি 40 মিমি ট্রিস অ্যাসিটেট এবং 1 মিমি ইডিটিএ, পিএইচ 8.3 ধারণকারী 1 mMTAE বাফার পেতে পাতলা করা হয়েছিল।1 mMTAE বাফার অ্যাগারোজ জেল এবং চলমান বাফার হিসাবে উভয়ই ব্যবহার করা যেতে পারে।সর্বাধিক রেজোলিউশনের জন্য, এটি সুপারিশ করা হয় যে প্রয়োগ করা ভোল্টেজ 5V/সেমি (ইউনিট ইলেক্ট্রোডের মধ্যে দূরত্ব) এর চেয়ে কম হওয়া উচিত।

ব্যবহার: ফায়ারফ্লাই লুসিফেরেসের সাথে এটিপি সনাক্তকরণে, এই পণ্যটি সবচেয়ে সংবেদনশীল বাফার;গ্লুটামেট বাঁধাই সনাক্তকরণ।

নন-রিসেপ্টর পদার্থের সাথে [3H]l-গ্লুটামিক অ্যাসিডের স্থানচ্যুতিযোগ্য বাঁধাই।

[৩এইচ] এল-গ্লুটামিক অ্যাসিড মাইক্রোফিউজ টিউব এবং কাচের সাথে সংযুক্ত চারটি বাফারে তদন্ত করা হয়েছিল।এই উপকরণগুলির সাথে পটভূমির আবদ্ধতা ছিল নগণ্য, তবে ট্রিস-এইচসিএল এবং ট্রিস-সিট্রেট বাফারে সেন্ট্রিফিউগেশন বা সাকশন দ্বারা বৃদ্ধি করা হয়েছিল।এই বাঁধাই অনেক কম ছিল বা যখন HEPES-KOH, বা Tris-acetate বাফার পরিবর্তে ব্যবহার করা হয়েছিল।[3H] মাইক্রোফিউজ টিউবগুলির সাথে L-গ্লুটামেট বাঁধাই L- দ্বারা বাধা ছিল কিন্তু গ্লুটামেট এবং অ্যাসপার্টেটের D-আইসোমার নয়।DL-2-amino-7-phosphonoheptanoic অ্যাসিডও বাঁধাইকে বাধা দেয়নি।অন্যান্য যৌগগুলি যা নিম্ন থেকে মাঝারি প্রতিবন্ধকতা দেখিয়েছিল: এন-মিথাইল-ডি-অ্যাসপার্টেট, কুইসকুলেট, এল-গ্লুটামিক অ্যাসিড ডাইথাইল এস্টার, এন-মিথাইল-এল-অ্যাসপার্টেট, কাইনেট এবং 2-অ্যামিনো-4-ফসফোনোবুটাইরেট।বিকৃত ইঁদুরের মস্তিষ্কের ঝিল্লি দ্বারা বাঁধাই বাধাপ্রাপ্ত হয়েছিল।একটি প্রোটিন-নির্ভর [3H] গ্লুটামেট বাঁধাই বারবার হিমায়িত-গলানো ঝিল্লি প্রস্তুতির সাথে প্রাপ্ত হয়েছিল যখন ট্রিস-এসিটেট বাফারে বাঁধাই করা হয়েছিল।এটি সুপারিশ করা হয় যে গ্লুটামেট বিন ডিং অ্যাসে ট্রিস-এসিটেট বা HEPES-KOH বাফার ব্যবহার করা উচিত।যদি Tris-HCl বা Tris-citrate বাফার ব্যবহার করা হয়, তাহলে মাইক্রোফিউজ টিউব বা গ্লাস ফাইবার ফিল্টারে বাঁধার জন্য সঠিক নিয়ন্ত্রণ পরীক্ষা করা উচিত।