পণ্য

ইউক্যারিওটিক কোষে চারটি ডিঅক্সিরাইবোনিউক্লিওসাইড ট্রাইফসফেটস (ডিএনটিপি) এর মিনিট পরিমাণের একটি সূক্ষ্ম ভারসাম্য থাকে, যা শুধুমাত্র কয়েক মিনিটের ডিএনএ প্রতিলিপির জন্য যথেষ্ট।একটি একক dNTP-এর ঘাটতি এবং উদ্বৃত্ত উভয়ের ফলে মিউটেশনের হার বৃদ্ধি, ত্রুটিপূর্ণ ডিএনএ মেরামত বা মাইটোকন্ড্রিয়াল ডিএনএ হ্রাস হতে পারে।dNTPs সাধারণত একটি এনজাইমেটিক অ্যাস দ্বারা পরিমাপ করা হয় যেখানে একটি ডিএনএ পলিমারেজ দ্বারা নির্দিষ্ট সিন্থেটিক অলিগোনিউক্লিওটাইডে তেজস্ক্রিয় dATP (বা dATP-এর জন্য অ্যাসে তেজস্ক্রিয় dTTP) অন্তর্ভুক্ত করা অজানা dNTP এর ঘনত্বের সমানুপাতিক।আমরা দেখতে পাই যে সাধারণত ব্যবহৃত ক্লেনো ডিএনএ পলিমারেজ অজানা dNTP-এর জন্য সংশ্লিষ্ট রাইবোনিউক্লিওটাইডকে প্রতিস্থাপন করতে পারে যা কিছু ক্ষেত্রে dNTP-এর একটি বড় অত্যধিক মূল্যায়নের দিকে নিয়ে যায়।আমরা এখন প্রতিটি dNTP-এর জন্য পরীক্ষা শর্ত বর্ণনা করি যা রাইবোনিউক্লিওটাইড অন্তর্ভুক্তি এড়ায়।dTTP এবং dATP পরীক্ষার জন্য এটি Klenow এনজাইম এবং লেবেলযুক্ত dATP (বা dTTP) এর ঘনত্ব কমিয়ে আনতে যথেষ্ট।dCTP এবং dGTP-এর জন্য আমাদেরকে তাক ডিএনএ পলিমারেজ বা থার্মো সিকুইনেজ দিয়ে ক্লেনো এনজাইম প্রতিস্থাপন করতে হয়েছিল।আমরা পরামর্শ দিই যে কিছু পূর্বের রিপোর্টে রাইবোনিউক্লিওটাইড সংযোজন ডিজিটিপি এবং ডিসিটিপির জন্য খুব বেশি মান সৃষ্টি করতে পারে।