পণ্য

5-ফ্লুরোরাসিল (5-এফইউ) এবং দুটি অন্তঃসত্ত্বা মনোফসফেট নিউক্লিওটাইডের বেশ কয়েকটি বিপাককে বিশেষভাবে পরিমাপ করতে, আমরা একটি তরল ক্রোমাটোগ্রাফি-ট্যান্ডেম ভর স্পেকট্রোমেট্রি (এলসি-এমএস/এমএস) এর উপর ভিত্তি করে একটি আসল পদ্ধতি তৈরি করেছি।এই পরীক্ষাটি নির্ধারণের অনুমতি দেয়: (i) 5-FU বা 5-ফ্লুরো-2′-ডিঅক্সিউরিডিন (5-FdUrd) থেকে 5-ফ্লুরো-2′-ডিঅক্সিউরিডিন-5′-মনোফসফেট (5-FdUMP) এর অন্তঃকোষীয় উত্পাদন , (ii) অন্তঃকোষীয় 2′-deoxyuridine-5′-monophosphate (dUMP)/thymidine-5′-monophosphate (TMP) অনুপাতের উপর 5-FdUMP ঘনত্বের প্রভাব, এবং (iii) 5-FdUMP এর নিঃসরণ ব্যাপ্তি এবং ABC ট্রান্সপোর্টারদের দ্বারা মানব সংস্কৃতির কোষ থেকে 5-FU।আমাদের পরীক্ষামূলক অবস্থার অধীনে, কোষগুলি 5-FU বা 5-FUrd দিয়ে ইনকিউবেট করা হয়েছিল।তারপরে, সেলুলার প্রোটিনগুলি মিথানল দ্বারা প্ররোচিত হয়েছিল।এই পদ্ধতি উচ্চ নিষ্কাশন পুনরুদ্ধার প্রদান.এছাড়াও, কোষ থেকে 5-FU এবং 5-FdUMP নিঃসরণ পরিমাপ করতে, আমরা সংস্কৃতির মাধ্যমে এই অণুগুলির পরিমাণ নির্ধারণ করেছি।মিডিয়া হয় সরাসরি ইনজেকশন (5-FU) বা Oasis Wax নিষ্কাশন কার্টিজ (5-FdUMP) ব্যবহার করে একটি কঠিন পর্যায়ে নিষ্কাশন করা হয়েছিল।মোবাইল ফেজ হিসাবে অ্যামোনিয়াম ফর্মেট বাফার/মিথানল/জল (5/5/90, v/v) ব্যবহার করে আইসোক্র্যাটিক মোড সহ একটি dC18 আটলান্টিস 3.5 μm, (100 mm × 2.1 mm id) কলামে বিশ্লেষকগুলির বিচ্ছেদ করা হয়েছিল।রান টাইম 6.2 মিনিটের বেশি হয়নি।বিশ্লেষণগুলি নেতিবাচক আয়ন মোডের অধীনে একটি ইলেক্ট্রোস্প্রে ইন্টারফেসে আয়নিত হয়েছিল।আমরা যৌগ অনুযায়ী 2.5-150 ng mL −1 এর পরিসরে পদ্ধতিটিকে বৈধ করেছি।সাত দিনের মধ্যে আন্তঃ- এবং আন্তঃ-অ্যাসের পরিবর্তনশীলতা 10% এর চেয়ে কম ছিল।সমস্ত যৌগগুলি কোষে বা সংস্কৃতির মাধ্যমে স্থিতিশীল ছিল যখন নমুনাগুলি কমপক্ষে দুই সপ্তাহের জন্য −20 °C এ সংরক্ষণ করা হয়েছিল এবং তিনটি ফ্রিজ-থাও চক্রের পরে।উভয় মিডিয়াতে কোন ম্যাট্রিক্স প্রভাব পরিলক্ষিত হয়নি।